A poliakrilamid gél készült slot benne . A gél képződik öntéssel forró folyadék poliakrilamid oldatot egy sekély dobozba . A doboz tartalmaznia kell egy szerkezetet comblike fogakkal le , hogy pont az oldatba . A poliakrilamid gél válik után hamarosan már öntjük , és a fésű eltávolítjuk , hogy felfedje négyszögletes lyukak .
Nátrium -dodecil -szulfát ( SDS) Matton
A fehérjét kezeljük nátrium-dodecil -szulfát (SDS ), annak érdekében , hogy denaturáljuk a alegységeket egy nagy fehérje , így mindegyiket külön-külön lehet mérni . Az előnye, hogy ez az, hogy a polipeptidek SDS adja a negatív töltés így azok felé vándorolnak a negatív végén, vagy anód , a gél . Másodszor, az SDS biztosítja minden alegységek ugyanaz lesz a töltés , és ezért minden vándorolnak a gélben szerint a molekuláris tömegek helyett díjakat.
Hozzáadása protein
egy kis mennyiségű DNS-t vagy fehérjét helyezünk az egyik téglalap alakú lyukak egyik végén a gél . Egy elektromos áram folyik keresztül a gél semleges pH-n. Körülbelül 10 mikroliter DNS- létra , valamint két kontroll is betöltve a gélt. A DNS- létra használják felméréséhez , hogy milyen messze a minta költözött a folyamat elektroforézis .
Elektroforézis
A gépet be kell kapcsolni , hogy a 100 voltos , és hagyja futni 30 percig. Miután a mintákat 30 percig elektroforézisnek , a gélt egy tálcával együtt eltávolítjuk és helyezzük festési tálcán körülbelül három percig . Ezt azután követi helyezve a gél meleg vízben öt percig. A gél készen kell helyezni a világító doboz , hogy tartsa be a mozgását a DNS- töredékek.
Egyéb szempontok : Matton
Amikor megtekinti a gélt a fény néhány fontos dolgot kell figyelembe venni . A sejt lehet heterozigóta vagy homozigóta a gén attól függően, hogy a másolat jelen van vagy nincs jelen , vagy mindkét példányban csak egy . A heterozigóta eredményeként jelenhetnek meg, mint egy egyetlen sávot , mert a DNS-szegmensek, amelyek hatékonyabban amplifikált megjelennek sötétebb a gélben . A festék is hozzátette , hogy minden egyes polipeptid látható alatt és után egyaránt elektroforézis .