Serafinowicz az 1990-es években kezdte pályafutását, a BBC Radio 1 „The Breeze” című vígjátékában és a Channel 4 „The Smell of Reeves és Mortimer” című szkeccsműsorban. Később főszerepet játszott saját sitcomjában, a "The Peter Serafinowicz Show"-ban (2001-2004), és számos filmben szerepelt, köztük a "Shaun of the Dead" (2004), a "Hot Fuzz" (2007), a "The Világvége” (2013) és „A galaxis őrzői” (2014).
Az elmúlt években Serafinowicz egyre ismertebbé vált szinkronszínészi munkáiról, hiszen a „Star Wars:Az ébredő Erő” (2015), az „Sing” (2016), a „Moana” (2016) és a karakterek hangját adta. "The Lego Batman Movie" (2017). Visszatérő szerepei voltak a "Rick and Morty" (2013-tól napjainkig) és a "BoJack Horseman" (2014-2020) animációs sorozatokban is.
Serafinowicz színészi és szinkronmunkája mellett számos rövidfilmet és zenei videót is rendezett, valamint számos televíziós műsornak és kiadványnak írt. Gyakori vendége a BBC Radio 4 „The News Quiz” című vígjáték panelműsorának, és saját podcastját is vezette, „The Peter Serafinowicz Show” (2012-2014) címmel.
Serafinowicz feleségül vette Sarah Alexander színésznőt, akitől két gyermeke született. A Munkáspárt támogatója, és hangos kritikusa volt a konzervatív kormánynak.