A főszereplők:
* Phineas Flynn: A találékony, energikus bátyja. Vincent Martella hangja.
* Ferb Fletcher: A csendes, leleményes öccs. Thomas Sangster hangja.
* Candace Flynn: A nővérük, aki megszállottan akarja lebuktatni őket őrült találmányaik miatt. Ashley Tisdale hangja.
* Perry, a Platypus: Phineas és Ferb kedvenc kacsacsőrűje, aki titokban az O.W.C.A. titkos ügynökeként dolgozik. (Organization Without a Cool Acronym). A hang:Dee Bradley Baker.
* Dr. Heinz Doofenshmirtz: A gonosz tudós, aki az utca túloldalán lakik, és folyamatosan megpróbálja elfoglalni a három állam területét. Dan Povenmire hangja.
* Isabella Garcia-Shapiro: Phineas szerelme, a Fireside Girls tagja. Alyson Stoner hangja.
* Buford Van Stomm: A kemény és kissé félénk zsarnok. Bobby Gaylor hangja.
* Baljeet Tjinder: Phineas és Ferb intelligens és gyakran ideges barátja. Maulik Pancholy hangja.
* Jeremy Johnson: Candace szerelme, egy népszerű fiú. Mitchel Musso hangja.
* Phineas és Ferb anyja: Szerető és támogató anya. Caroline Rhea hangja.
* Phineas és Ferb apja: Nyugodt és gyakran figyelmen kívül hagyó apa. Richard O'Brien hangja.
Ismétlődő karakterek:
* Fő monogram: Perry főnöke az O.W.C.A. Jeff "Swampy" Marsh hangja.
* P ügynök: Perry titkosügynök kódneve.
* Stacy Hirano: Candace legjobb barátja, aki gyakran szkeptikus Candace Phineas és Ferb lebuktatására tett kísérleteivel kapcsolatban. Kelly Hu hangja.
* The Fireside Girls: Egy csapat lány, akik mindig szívesen segítenek Phineasnak és Ferbnek. Alyson Stoner, Ashley Tisdale és mások hangja.
* A Gonosz Sidekick: Doofenshmirtz bugyuta asszisztense. A hang:Dee Bradley Baker.
* Vanessa Doofenshmirtz: Doofenshmirtz tinédzser lánya, akit általában zavarba hoznak apja gonosz bohóckodásai. Olivia Olson hangja.
* Norm: Doofenshmirtz robot komornyik.
* A Narrátor: Egy titokzatos hang, aki elmeséli sok epizódot. A hang:Dee Bradley Baker.
Ez a lista a legtöbb főszereplőt lefedi, de Phineas és Ferb nagy összetételű szereplőgárdájáról és számos visszatérő karakteréről ismert, így még sok karaktert lehetne felsorolni!