A boszorkányok először az 1. felvonás 3. jelenetében mutatkoznak be, amikor találkoznak Macbeth-tel és Banquóval a palánkon. Három jóslattal köszöntik Macbethet:Cawdor Thane, Glamis Thane és Skócia királya lesz. Banquónak három próféciát is adnak, de ezek nem annyira konkrétak. A boszorkányok próféciái a becsvágy magvait ültetik el Macbeth elméjében, és ő elkezdi beteljesíteni azokat.
A boszorkányok ismét megjelennek a 3. felvonás 5. jelenetében, amikor Macbeth meglátogatja őket a barlangjukban. Egy sor látomást mutatnak be neki, amelyek a jövőjét és tettei következményeit jelenítik meg. A boszorkányok azt is elmondják Macbethnek, hogy "Birnam Wood" és "egy nem nőtől született férfi" fogja legyőzni. Ezek a próféciák arra késztetik Macbethet, hogy azt higgye, hogy legyőzhetetlen, és még könyörtelenebbé válik a hatalomra való törekvésben.
A boszorkányok döntő szerepet játszanak Macbeth bukásában. Megindítják azokat az eseményeket, amelyek elpusztulásához vezetnek, és azt a hamis biztonságérzetet nyújtják számára, amely végül a vereségéhez vezet. A boszorkányok hatalmas és veszélyes erők, és az emberi természet sötét oldalát képviselik.
A boszorkányok amellett, hogy egyfajta titokzatosságot és feszültséget keltenek, a darab témáihoz is hozzászólnak. Azokat a természetfeletti erőket képviselik, amelyek befolyásolhatják az emberi viselkedést, és megmutatják, hogy az ambíció és a hatalom milyen könnyen elronthatja az embereket. A boszorkányok figyelmeztetik a közönséget, hogy a féktelen ambíció tragikus következményekhez vezethet.