Ben Reilly nem játszható karakter ebben a játékban. A játék két játszható karaktert tartalmaz:
* Peter Parker/Pókember: Ez az alapértelmezett és fő játszható karakter.
* Szimbióta Pókember: Ez a jelmez a sztori végighaladása után feloldódik, és különböző játékmechanizmusokat kínál.
Bár több alternatív jelmez is van Peter Parker számára, Ben Reilly Scarlet Spider jelmeze nem tartozik ezek közé.